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使用方法:

1.準(zhǔn)備適當(dāng)稀釋比例的細(xì)胞懸液。

2.取出干凈的細(xì)胞計數(shù)板，從計數(shù)室兩側(cè)的加樣口緩慢加入 6-10uL 細(xì)胞懸液。注意不要有氣泡可同時計數(shù) 4個樣品。

3. 將計數(shù)板置于顯微鏡上，找到計數(shù)視野。靜置 2-3min，待細(xì)胞沉降到計數(shù)板上，不再隨液體漂移。

4.采用合適的方法進(jìn)行計數(shù)并計算細(xì)胞數(shù)目。

計數(shù)方法:

1) 針對常規(guī)培養(yǎng)動物細(xì)胞

a）選取計數(shù)室四角 4個大方格 (每個大方格由16個中方格組成)，即圖示 W1，W2，W3,

W4，進(jìn)行計數(shù)。

b）建議調(diào)整細(xì)肥密度為每個大方格細(xì)胞個數(shù)為100左右。

c）鏡下偶見有兩個以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán)，應(yīng)按單個細(xì)胞計算，若細(xì)胞團(tuán) 10%以上，說明分散不好，需重新制備細(xì)胞懸液。計數(shù)一般遵循記上不計下，計左不計右原則。

d）細(xì)胞數(shù)目計算方法:

每個大方格面積為1mmx1mm，蓋玻片與計數(shù)室間高度為 0.1mm，即每個大方格體積為

1mmX1mmx0.1mm=0.1mm3=0.1uL =10mL-4。

2)針對其他小型細(xì)胞 (血細(xì)胞、細(xì)菌、酵母等)。

a ）選取計數(shù)室中央計數(shù)區(qū) (含 25 個中方格每個中方格含 16 個小方格，共400 個小方格) 進(jìn)行計數(shù)。分別計數(shù) 5個中方格 (如圖示1，2，3，4，5，或四角和中央一個中方格。

b )建議計數(shù)時每 2個中方格細(xì)胞個數(shù)相差不超過20。

c）鏡下偶見有兩個以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán)，應(yīng)按單個細(xì)胞計算，若細(xì)胞團(tuán) 10%以上，說明

分散不好，需重新制備細(xì)胞懸液。計數(shù)一般遵循記上不計下，計左不計右原則。

d）細(xì)胞數(shù)目計算方法:

每個中方格面積為0.2mmX0.2mm，蓋玻片與計數(shù)室間高度為 0.1mm，即每個中方格體積

為0.2mmx0.2mmx0.1mm=0.004mm3=0.004uL=4X10-6mL。