厭氧菌只能在沒有游離氧存在時才能生長繁殖
更新時間：2021-12-27 點擊次數(shù)：752次
厭氧菌只能在沒有游離存在時才能生長繁殖，在有氧的環(huán)境中不能生長甚至死亡，所以在研究分離及鑒定時，必須在低氧化還原電勢的厭氧環(huán)境中進行。根據(jù)物理、化學(xué)或兩者結(jié)合建立起來的厭氧菌的培養(yǎng)方法很多。操作簡單、要求相對低的培養(yǎng)方法有厭氧袋、皰肉培養(yǎng)基法、堿性焦性沒食子酸法等，對厭氧環(huán)境要求高、操作復(fù)雜的培養(yǎng)方法有厭氧手套箱和Hungate技術(shù)。厭氧菌的培養(yǎng)基可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。其中厭氧罐法有如下的原理：
1.厭氧罐體的結(jié)構(gòu)
目前使用的厭氧罐的罐體采用透明聚碳酸酯硬質(zhì)塑料或不銹鋼制成。圓形罐蓋的周邊凹槽內(nèi)嵌有橡皮圈，能使罐體和蓋密封。罐體與罐蓋之間有一個大的金屬螺旋夾，可使罐體密閉。罐體內(nèi)蓋的正中下方，有個金屬絲網(wǎng)盒或金屬盤，用于放催化劑。
2.厭氧罐的原理
原理是用物理或化學(xué)的方法把密閉容器中的氧除去，制造一個無氧環(huán)境。常用的方法是油氣換氣法和氣體發(fā)生袋法。
抽氣換氣法：先把需厭氧培養(yǎng)的平板或液體瓶放入真空厭氧缸或厭氧罐中，再放入鈀粒催化劑(可使罐中的氧與氫反應(yīng)生成水，除去氧)和美藍(lán)指示劑(缸中有氧時，指示劑為藍(lán)色，缸中無氧時，指示劑變無色),然后利用真空泵對真空厭氧缸或厭氧罐抽真空，再反復(fù)充入無氧的氮氣3次，最后充入80%的氮氣、10%的氫氣和10%二氧化碳的混合氣體。鈀粒能夠促使混合氣體中氧反應(yīng)掉，美藍(lán)指示劑顯示無色，則厭氧環(huán)境形成。鈀粒催化劑用過后，經(jīng)干熱2h后可重復(fù)使用。打開觀察培養(yǎng)物后需重新抽氣換氣。
該法的特點是只利用化學(xué)方法造成無氧環(huán)境，簡便易行。該方法是在厭氧罐中放一個氫氣、二氧化碳?xì)怏w發(fā)生袋、催化劑、美藍(lán)指示劑。在鈀粒催化劑的作用下，罐中的氧氣和氫氣反應(yīng)生成水，從而造成罐內(nèi)的無氧環(huán)境。氣體發(fā)生袋是由一丸硼氫化鈉氯化鈷合劑、一丸碳酸氫鈉檸檬酸合劑及一片濾紙條組成。使用時剪去指定部分的一角，加入10 mL水，水沿濾紙滲到兩個試劑丸上，發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生氫氣和二氧化碳。
使用時，加水后應(yīng)立即放入罐中并密閉，即可厭氧培養(yǎng)。
