美國(guó)Biozellen®基質(zhì)膠在細(xì)胞3D成球?qū)嶒?yàn)中的應(yīng)用
一、應(yīng)用
•3D細(xì)胞球體培養(yǎng)試驗(yàn)
•小鼠皮下成瘤
•細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
•適合用于3D細(xì)胞藥物篩檢平臺(tái)
•細(xì)胞生長(zhǎng)和分化
•代謝/毒理學(xué)研究
二、試劑盒組分
B-P-00002-2、B-P-00002-4、B-P-00002-10 | |||
貨號(hào). | Components | Amount | Content |
B-P-00002-A | A 基質(zhì)膠 (2X) | 4、8、20 | 0.5mL / tube |
B-P-00002-C | C 緩沖溶液 (10X) | 1、2、1 | 1*10ml、2*10ml、1*50 mL / BT |
B-P-00002-D | D 緩沖溶液 (10X) | 1、2、1 | 1*10ml、2*10ml、1*50 mL / BT |
三、全部步驟需要在無(wú)菌環(huán)境內(nèi)操作，操作步驟如下：
1. 將24孔培養(yǎng)板放置于冰上預(yù)冷半小時(shí)。
2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)后取 2×105~2×107 細(xì)胞與 0.5 毫升 37℃ 細(xì)胞培養(yǎng)基均勻混合，并與0.5毫升37℃ A膠按照 1:1 等比例均勻混合，最終細(xì)胞密度1*105~1*107cells/mL。
注：請(qǐng)選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)溶液與條件進(jìn)行試驗(yàn)。
3.取 20-40 微升步驟 2的混合液滴于 步驟 1 預(yù)冷的培養(yǎng)板上，膠體將于 5 分鐘內(nèi)成膠。 注: 測(cè)試膠體是否成膠，可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進(jìn)行確認(rèn)。
4.待膠體成膠后，添加1毫升冰的1X C緩沖溶液，并蓋過(guò)步驟3 的膠溶液，固定 15 分鐘。
5.待15分鐘固定后，小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細(xì)胞生長(zhǎng)之培養(yǎng)基溶液。
6將含有細(xì)胞的膠于37°C 二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行7~14天的培養(yǎng)，并觀察細(xì)胞球體的形成，按正常培養(yǎng)基更換頻率進(jìn)行更換操作。
四、Biozellen®3D細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝
貨號(hào). B-P-00002-2、B-P-00002-4、B-P-00002-10
規(guī)格 2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit
Storage 4℃保存、 保存兩年
五、案例分享
A.形成3D腫瘤球體成功案例分享
B.Biozellen基質(zhì)膠被溶解后分離的完整3D細(xì)胞結(jié)構(gòu)照片
培養(yǎng)后的3D細(xì)胞球體， 在Biozellen基質(zhì)膠被試劑盒里面的
D Buffer溶解分離后仍然可以得到完整的3D細(xì)胞結(jié)構(gòu)
上海市楊浦區(qū)國(guó)康路100號(hào)2層
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