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服務簡介

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究兩種蛋白質相互作用的有效方法。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內(nèi)結合，也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔，已成為研究蛋白質相互作用的經(jīng)典方法。

當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內(nèi)存在的許多蛋白質－蛋白質間的相互作用被保留了下來。當用預先固化在argarose beads上的蛋白質A的抗體免疫沉淀A蛋白，那么與A蛋白在體內(nèi)結合的蛋白質B也能一起沉淀下來。再通過蛋白變性分離，對B蛋白進行檢測，進而證明兩者間的相互作用。

這種方法得到的目的蛋白是在細胞內(nèi)與興趣蛋白天然結合的，符合體內(nèi)實際情況，得到的結果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內(nèi)結合；也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。

免疫共沉淀服務價格與周期

免疫共沉淀服務步驟

（1）轉染后24-48 h 可收獲細胞，加入適量細胞裂解緩沖液（含蛋白酶抑制劑），冰上裂解30min, 細胞裂解液于4°C， 大轉速離心30 min后取上清；

（2）取少量裂解液以備Western blot分析，剩余裂解液加1μg相應的抗體加入到細胞裂解液，4°C緩慢搖晃孵育過夜；

（3）取10μl protein A 瓊脂糖珠，用適量裂解緩沖液洗3 次，每次3,000 rpm離心3 min；

（4）將預處理過的10μl protein A 瓊脂糖珠加入到和抗體孵育過夜的細胞裂解液中4°C緩慢搖晃孵育2-4h，使抗體與protein A瓊脂糖珠耦聯(lián)；

（5）免疫沉淀反應后，在4°C 以3,000 rpm 速度離心3 min，將瓊脂糖珠離心至管底；將上清小心吸去，瓊脂糖珠用1ml裂解緩沖液洗3－4次；后加入15μl的2×SDS 上樣緩沖液，沸水煮5分鐘；

（6）SDS-PAGE, Western blotting或質譜儀分析。

客戶提供

客戶提供蛋白樣品和沉淀用抗體；

新鮮的樣本材料（組織、細胞或蛋白溶液）；

用于western blot的一抗。

生物服務承諾
免疫共沉淀電子圖片及分析結果；
相互作用蛋白鑒定結果，質譜鑒定結果和（或）western blot鑒定結果。